Главная » Лечение антибиотиками

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам

Определение чувствительности микроорганизмов, выделенных из патологического материала, к антибактериальным препаратам

Антимикробная химиотерапия - лечение вызванных микроорганизмами инфекционных и воспалительных заболеваний лекарственными препаратами, избирательно действующими на эти микроорганизмы.

Нерациональное применение, а порой и злоупотребление противомикробными препаратами, способствует развитию у микроорганизмов различных механизмов устойчивости к действию антибиотиков. Вследствие этого участились случаи неудач при лечении антибиотиками.

Основной целью исследования чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам является выявление устойчивости (резистентности) к некоторым из них.

Это микробиологическое исследование является необходимым звеном в бактериологической диагностике для обоснования назначения оптимальной индивидуальной антибиотикотерапии конкретному больному.

Исследованию подлежат все выделенные из патологического материала патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, роль которых в возникновении данного заболевания доказана.

В бактериологической лаборатории ГБУЗ НО КДЦ имеются методы исследований микроорганизмов к антибиотикам всех известных групп, в том числе новых поколений.

В экстренных случаях в лаборатории используется экспресс метод изучения антибиотикочувствительности.

При тяжелой клинике заболевания и множественной устойчивости выделенного микроорганизма к антибиотикам бывает необходимость в осуществлении более трудоемкого метода разведений препарата в питательных средах. Метод позволяет более углубленно изучить действие антибиотика на микроорганизм и определить степень чувствительности испытуемой культуры к выбранному препарату. В ответе указывается минимальная подавляющая концентрация (МПК) антибиотика.

Запись
на платный прием

Критерии для определения чувствительности и резистентности

Целью лабораторного исследования чувствительности бактерий к антибиотикам является идентификация возбудителей, вызывающих инфекционные заболевания, и установление их чувствительности или устойчивости к антибактериальным средствам, используемым по общепринятым схемам терапии [26]. Полученная информация может быть использована для выбора оптимального лекарственного средства в начале лечения, для контроля эффективности терапии или для установления чувствительности бактерий к антибиотикам внутри конкретной популяции микроорганизмов (например, внутригоспитальных штаммов) с целью выбора эффективного препарата для начала лечения. Эффективность терапии зависит как от проведенного курса, так и от состояния организма больного, в том числе его защитной реакции и фармакокинетики лекарственного вещества.

Лабораторные тесты определения чувствительности не могут дать исчерпывающей информации о чувствительности к антибиотику in vivo. Для того чтобы достаточно точно выбрать наиболее эффективный антибиотик для лечения инфекции, было использовано несколько различных критериев для решения вопроса об определении чувствительности или резистентности бактерий к доступным антибактериальным средствам:

Клиническая эффективность

Является наиболее достоверным тестом определения чувствительности чистой культуры микроорганизмов к исследуемому антибиотику [8].

Уровень антибиотика в сыворотке крови

Второй общепринятый метод определения чувствительности основан на сравнении концентрации, обеспечивающей подавление роста микроорганизмов и концентрации, создаваемой в сыворотке крови. Ингибирующую концентрацию исследуемого антибиотика определяют по одной или нескольким стандартным методикам и соотносят ее с уровнем в сыворотке крови, который достигается при применении обычно рекомендуемых доз и способов введения антибиотика. Так как точно определить концентрацию препарата в сыворотке крови трудно, то были предложены дополнительные меры предосторожности, чтобы в крови не создавались опасно высокие концентрации препарата. Так, часто стремятся к тому, чтобы минимальная подавляющая концентрация (МПК) составляла четвертую часть или меньше от среднего показателя концентрации в крови [8,13,26]. При воздействии на микроорганизмы, для которых МПК значительно ниже, чем концентрация в сыворотке крови, этот метод вполне удовлетворителен.

Изменение чувствительности у микроорганизмов одного вида

Третий метод определения критерия чувствительности основан на сравнении чувствительности микроорганизмов, выделенных от больного, и чувствительности всей популяции этого же вида микроорганизмов или близких микроорганизмов. В случае появления в популяции одного вида микроорганизмов, менее чувствительных к препарату, их можно отнести к группе сравнительно резистентных или абсолютно резистентных штаммов [8].

Информация общего и коммерческого характера
  • Проект технического задания на продукцию НИИЭМ имени Пастера. Это поможет вам!
    Информация научного характера
    • Современная лабораторная диагностика туберкулёза легких
    • Культуральная диагностика микоплазмоза и уреаплазмоза
    • Антибиотики для лечения уреаплазмоза и микоплазмоза
    • Хромогенные питательные среды
    • Лабораторные методы диагностики урогенитального трихомониаза (обзор литературы)
    • Регистрационные удостоверения
      • Набор дисков для определения чувствительности к противомикробным препаратам - 1 (НД-ПМП-1)
      • Набор реагентов Диагностикум эритроцитарный коревой антигенный сухой для реакции пассивной гемагглютинации (РПГА)
      • Набор реагентов для визуального выявления Mycoplasma hominis (МИКОПЛАЗМА-50)
      • Набор реагентов для визуального выявления Ureaplasma urealyticum (УРЕАПЛАЗМА-50)

      ФБУН НИИ эпидемиологии
      и микробиологии имени Пастера
      Отдел новых технологий

      Поиск по сайту

      Метод бумажных дисков

      Взвесь изучаемой культуры засевают «газоном». Засеянные чашки подсушивают 30-40 минут при комнатной температуре. Затем на поверхность засеянного агара пинцетом накладывают бумажные диски, пропитанные растворами различных антибиотиков. Содержание препарата определяется исходя из терапевтических концентраций каждого антибиотика и средних значений МПК для патогенных бактерий. Название препарата и его количество обозначено на каждом диске. Диски накладывают на равном расстоянии друг от друга и на расстоянии 2 см от края чашки. Одну чашку можно использовать для изучения чувствительности одного штамма к 4-5 антибиотикам.

      Засеянные чашки с нанесёнными на них дисками помещают в термостат при 37 0 С на 18-24 ч. Чашки ставят вверх дном, чтобы избежать попадания конденсационной воды на поверхность посевов (рис. 1).

      Рисунок - 1. Определение антибиотикочувствительности диско-диффузионным методом.

      Учет результатов проводят по феномену задержки роста вокруг диска. Диаметр зон задержки роста микробов вокруг дисков определяют с помощью линейки для миллиметровой бумаги, включая диаметр для самого диска. Размеры зон, полученных в опыте, сравнивают с размерами зон задержки роста указанных в инструкциях, прилагаемых к дискам. В зависимости от зоны задержки роста микроорганизмов их относят к чувствительным, умеренно чувствительным или резистентным (таблица 4).

      Метод дисков имеет ряд ограничений:

      - метод дисков не может быть использован для определения чувствительности к антибиотикам медленно растущих бактерий (Mycobacterium spp. Helicobacter spp. Bacteroides spp. Brucella spp. и др.);

      - метод дисков не дает надежных результатов при определении чувствительности бактерий к препаратам, плохо диффундирующим в агар (полимиксин, ристомицин);

      - в 30 % случаев чувствительность in vitro не соответствует таковой in vivo.

      Таблица 4. - Интерпретация результатов определения чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков (на среде АГВ)

      Цефалоспорины Цефалотин Цефазолин Цефуроксим Цефокситин Цефотаксим Цефтриаксон Цефоперазон Цефтазидим Цефалексин Цефаклор Цефиксим Цефепим*

      #8804;14 #8804;14 #8804;14 #8804;14 #8804;14 #8804;14 #8804;14 #8804;14 #8804;14 #8804;14 #8804;15 #8804;14

      15 – 18 15 – 18 15 – 18 15 – 18 15 – 20 15 – 20 15 – 18 15 – 17 15 – 18 15 – 18 15 – 19 15 – 17

      19 19 19 19 21 21 19 18 19 19 20 18

      Новые бета-лактамы Имипенем* Меропенем*

      Хинолоны Ципрофлоксацин Офлоксацин Налидиксовая кислота

      #8804;15 #8804;12 #8804;12

      16 - 20 13 – 16 13 - 17

      21 17 18

      Аминогликозиды Стрептомицин Канамицин Гентамицин Сизомицин Тобрамицин Амикацин Нетилмицин

      #8804;16 #8804;14 #8804;15 #8804;15 #8804;14 #8804;14 #8804;12

      17 - 19 15 - 18 - - - 15 - 16 13 - 14

      20 19 16 16 15 17 15

      Тетрациклины, макролиды, линкозамиды Тетрациклин Доксициклин Эритромицин Азитромицин Рокситромицин* Кларитромицин* Линкомицин Клиндамицин Олеандомицин

      #8804;16 #8804;15 #8804;17 #8804;13 #8804;14 #8804;13 #8804;19 #8804;14 #8804;16

      17 – 20 16 - 19 18 – 21 14 - 17 15 - 18 14 - 17 20 - 23 15 – 20 17 - 20

      22 20 22 18 19 18 24 21 21

      Антибиотики других групп Хлорамфеникол (левомецитин) Фузидиевая кислота Рифампицин Полимиксин Ванкомицин: · для стафилококков; · для энтерококков. Ристомицин Фурадонин Фурагин

      #8804;15 #8804;16 #8804;12 #8804;11 #8804;11 #8804;14 #8804;9 #8804;15 #8804;15

      16 - 18 17 –20 13 – 15 12 - 14 - 15 – 16 10 – 11 16 – 18 16 - 18

      19 21 16 15 12 17 12 19 19

      Метод лунок (исходный метод)

      Готовят чашки Петри и заполняют их питательной средой, слоем 4-5 мм. После застывания агар подсушивают в термостате при 37 0 С в течение 20 минут. Взвесь изучаемой культуры засевают «газоном», излишки микробной взвеси удаляют и еще раз подсушивают в термостате. Затем в агаре пробивают лунки и в каждую лунку вносят по 0,1 мл раствора исследуемого антибиотика. После инкубации в термостате учитывают активность, измеряя диаметр зоны подавления роста для каждого антибиотика.

      Источники: http://www.dcnn.ru/menu_about/menu_structura/103-%25D0%25B1%25D0%25B0%25D0%25BA%25D1%2582%25D0%25B5%25D1%2580%25D0%25B8%25D0%25BE%25D0%25BB%25D0%25BE%25D0%25B3%25D0%25B8%25D1%2587%25D0%25B5%25D1%2581%25D0%25BA%25D0%25B0%25D1%258F-%25D0%25BB%25D0%25B0%25D0%25B1%25D0%25BE%25D1%2580%25D0%25B0%25D1%2582%25D0%25BE%25D1%2580%25D0%25B8%25D1%258F/155-%25D0%25BE%25D0%25BF%25D1%2580%25D0%25B5%25D0%25B4%25D0%25B5%25D0%25BB%25D0%25B5%25D0%25BD%25D0%25B8%25D0%25B5-%25D1%2587%25D1%2583%25D0%25B2%25D1%2581%25D1%2582%25D0%25B2%25D0%25B8%25D1%2582%25D0%25B5%25D0%25BB%25D1%258C%25D0%25BD%25D0%25BE%25D1%2581%25D1%2582%25D0%25B8-%25D0%25BC%25D0%25B8%25D0%25BA%25D1%2580%25D0%25BE%25D0%25BE%25D1%2580%25D0%25B3%25D0%25B0%25D0%25BD%25D0%25B8%25D0%25B7%25D0%25BC%25D0%25BE%25D0%25B2, -%25D0%25B2%25D1%258B%25D0%25B4%25D0%25B5%25D0%25BB%25D0%25B5%25D0%25BD%25D0%25BD%25D1%258B%25D1%2585-%25D0%25B8%25D0%25B7-%25D0%25BF%25D0%25B0%25D1%2582%25D0%25BE%25D0%25BB%25D0%25BE%25D0%25B3%25D0%25B8%25D1%2587%25D0%25B5%25D1%2581%25D0%25BA%25D0%25BE%25D0%25B3%25D0%25BE-%25D0%25BC%25D0%25B0%25D1%2582%25D0%25B5%25D1%2580%25D0%25B8%25D0%25B0%25D0%25BB%25D0%25B0, -%25D0%25BA-%25D0%25B0%25D0%25BD%25D1%2582%25D0%25B8%25D0%25B1%25D0%25B0%25D0%25BA%25D1%2582%25D0%25B5%25D1%2580%25D0%25B8%25D0%25B0%25D0%25BB%25D1%258C%25D0%25BD%25D1%258B%25D0%25BC-%25D0%25BF%25D1%2580%25D0%25B5%25D0%25BF%25D0%25B0%25D1%2580%25D0%25B0%25D1%2582%25D0%25B0%25D0%25BC, http://www.dntpasteur.ru/metodic5_2_1.php, http://studopedia.org/3-33185.html

      Комментариев пока нет!

      Ваше имя *
      Ваш Email *

      Сумма цифр внизу: код подтверждения